The past, present and future of Alzheimer's disease - part 1: the past / O passado, presente e futuro da doença de Alzheimer - parte 1: o passado

Abstract Background Alzheimer's disease (AD) was described in 1907, and since then it changed from a relatively rare condition to one of the most prevalent diseases. Objective To describe the evolution of the notions of dementias and AD, and to investigate the reasons for the increase in scientific interest in AD. Methods A historical analysis was carried out on knowledge about dementia, the site of mental activity, the relationships between brain diseases and mental activity, and on the advances in research about AD, since its discovery until the publication of the amyloid cascade hypothesis in 1992. A search was carried out in the National Library of Medicine (PubMed) for scientific articles that included the terms dementia or AD over 50 years, from 1972 to 2021. Results The scientific research on AD increased from 615 papers with the term AD in the first decade (1972-1981), to 100,028 papers in the last decade (2012-2021): an increase of 162.6 times whereas publications with the term dementia increased 28.6 times in the same period. In the 1960s and 1970s, a consensus was reached that AD is responsible for the majority of cases of dementia previously known as senile dementia. In the 1980s, beta-amyloid peptide was identified in the core of the senile plaque, hyperphosphorylated tau protein was found in neurofibrillary tangles, and a mutation was discovered in a hereditary form of AD. Conclusion The expansion of the concept of AD to include senile dementia, and the discoveries that occurred in the 1980s greatly expanded research in AD.

Resumo Antecedentes A doença de Alzheimer (DA) foi descrita em 1907 e, desde então, deixou de ser relativamente rara para se tornar uma das doenças mais prevalentes. Objetivo Descrever a evolução das noções sobre demências e DA e investigar as razões do aumento do interesse científico pela DA. Métodos Foi realizada uma análise histórica dos conhecimentos sobre demência, o local da atividade mental, as relações entre doenças cerebrais e a atividade mental, e sobre os avanços na pesquisa sobre a DA, desde a sua descoberta até a publicação da hipótese da cascata amiloide em 1992. Foi realizada uma busca na Biblioteca Nacional de Medicina dos Estados Unidos da América (PubMed) por artigos científicos que incluíssem os termos demência ou DA nos 50 anos, de 1972 a 2021. Resultados A pesquisa científica sobre DA aumentou de 615 artigos com o termo doença de Alzheimer na primeira década (1972-1981), para 100.028 artigos na última década (2012-2021): um aumento de 162,6 vezes enquanto as publicações com o termo demência aumentaram 28,6 vezes no mesmo período. Nas décadas de 1960 e 1970, chegou-se a um consenso de que a DA é responsável pela maioria dos casos de demência, anteriormente conhecida como demência senil. Na década de 1980, o peptídeo beta-amiloide foi identificado no núcleo da placa senil, a proteína tau hiperfosforilada foi encontrada em emaranhados neurofibrilares e uma mutação foi descoberta em uma forma hereditária de DA. Conclusão A expansão do conceito de DA para incluir a demência senil e as descobertas ocorridas na década de 1980 ampliaram enormemente a pesquisa em DA.

Efeito do jejum agudo no período ativo sobre os peptídeos gastrointestinais em mulheres eutróficas e com obesidade / Effect of acute fasting in the active period on gastrointestinal peptides in women eutrophic and with obesity

A prática do jejum tem mostrado resultados benéficos no que diz respeito aos parâmetros metabólicos e perda de peso. Essa prática tem sido frequentemente realizada ao longo do dia, durante as atividades de vida diária dos indivíduos. Dentre os efeitos do jejum sobre o metabolismo intermediário, destaca-se seu potencial em modular a secreção de peptídeos gastrointestinais relacionados ao controle da fome e regulação metabólica. Por outro lado, é desconhecido os efeitos do jejum agudo durante as atividades de vida diária, diferentemente do realizado durante a noite, e ainda se indivíduos eutróficos e com obesidade respondem da mesma forma. Objetivo: Investigar o efeito do jejum agudo realizado durante o período ativo sobre os peptídeos gastrointestinais em mulheres eutróficas e com obesidade. Métodos: Trata-se de ensaio clínico não randomizado, estratificado por estado nutricional em dois grupos de acordo com o Índice de Massa Corporal (IMC): (i) grupo eutrófico (IMC > 18,5 kg/m² e < 24,9 kg/m²) e (ii) grupo obesidade (IMC > 35 kg/m²). A amostra foi composta por mulheres adultas, com idade entre 18 a 60 anos. A avaliação inicial foi realizada no período da manhã, após 10h de jejum noturno, em que as seguintes medidas foram aferidas e os dados pessoais foram coletados: antropometria, calorimetria indireta e composição corporal. As participantes foram submetidas à coleta de 5 mL de sangue, para análise dos peptídeos gastrointestinais (GIP, GLP-1, PP, PYY e grelina), adiponectina, insulina (glicose e índices HOMA). Em seguida, foi ofertado desjejum padronizado com valor calórico correspondente a 20% da necessidade energética estimada calculada após a coleta dos dados iniciais. Após, as voluntárias foram dispensadas para realização das atividades diárias habituais e foi orientado a manutenção do jejum por 10h ao longo do dia. As voluntárias retornaram ao final do dia para repetição dos procedimentos realizados na primeira avaliação e coleta de sangue. As análises estatísticas foram efetuadas com o auxílio dos programas Statistical Package for the Social Sciences for Windows Student Version® (SPSS) versão 20.0 e os gráficos foram criados por meio do programa GraphPad Prism versão 8.0.1, adotando-se nível de significância de 5%. Resultados: 54 mulheres foram incluídas no estudo, sendo 29 no grupo eutrófico e 25 no grupo com obesidade. O jejum no período ativo promoveu redução nas concentrações de insulina e adiponectina e nos índices HOMA-IR e HOMA-BETA, além de aumento no polipeptídeo pancreático (PP) circulante, tanto nas mulheres eutróficas como nas mulheres com obesidade. Somente o grupo com obesidade teve redução na leptina e aumento no peptídeo-1 semelhante ao glucagon (GLP-1) após o jejum diurno. Entre os grupos, eutrofia versus obesidade, as concentrações de leptina e insulina foram maiores no grupo obesidade após o jejum no período ativo. Já os peptídeos GIP, grelina e peptídeo YY (PYY) não tiveram mudanças após o jejum no período ativo quando comparados ao jejum noturno. Conclusão: O jejum durante as atividades diárias diminui os hormônios anorexígenos insulina e leptina. No entanto, também aumenta o PP e o GLP-1, especialmente em mulheres com obesidade. O jejum durante as atividades diárias pode reorganizar uma intrincada rede de sinais endócrinos que de alguma forma podem modular o comportamento alimentar homeostático e hedônico.

Fasting practice has shown beneficial results concerning metabolic parameters and weight loss. This practice is often performed throughout the day during individuals daily life activities. Among the effects of fasting on intermediary metabolism, its potential to modulate the secretion of gastrointestinal peptides related to hunger control and metabolic regulation stands out. On the other hand, the effects of acute fasting during daily activities, unlike fasting during the night, and whether eutrophic and individuals with obesity respond in the same way are unknown. Objective: To investigate the effect of acute fasting during the active period on gastrointestinal peptides in eutrophic women and with obesity. Methods: This was a non-randomized clinical trial, stratified by nutritional status into two groups according to Body Mass Index (BMI): (i) eutrophic group (BMI > 18.5 kg/m² and < 24.9 kg/m²) and (ii) group with obesity (BMI > 35 kg/m²). The sample consisted of adult women aged 18 to 60 years. The initial evaluation was conducted in the morning after a 10-hour overnight fasting, during which the following measurements were taken, and personal data were collected: anthropometry, indirect calorimetry, and body composition. Participants had 5 mL of blood collected for the analysis of gastrointestinal peptides (GIP, GLP-1, PP, PYY, and ghrelin), adiponectin, insulin (glucose and HOMA indices). Then, a standardized breakfast with a caloric value corresponding to 20% of the estimated energy needs calculated after the initial data collection was provided. Afterward, the participants were released to perform their usual daily activities and were instructed to maintain fasting for 10 hours throughout the day. Participants returned at the end of the day for the repetition of the procedures performed in the initial assessment and blood collection. Statistical analyses were performed using the Statistical Package for the Social Sciences for Windows Student Version® (SPSS) version 20.0, and the graphs were created using the GraphPad Prism version 8.0.1 program, adopting a significance level of 5%. Results: 54 women were included in the study, with 29 in the eutrophic group and 25 in the group with obesity. Fasting during the active period led to a reduction in insulin and adiponectin concentrations and in HOMA-IR and HOMA-BETA indices, as well as an increase in circulating pancreatic polypeptide (PP), both in eutrophic women and with obesity. Only the group with obesity experienced a reduction in leptin and an increase in glucagon-like peptide-1 (GLP-1) after daytime fasting. Between the eutrophic group and with obesity, leptin and insulin concentrations were higher in the group with obesity after fasting during the active period. GIP, ghrelin, and peptide YY (PYY) did not show changes after fasting during the active period when compared to overnight fasting. Conclusion: Fasting during daily activities reduces anorexigenic hormones insulin and leptin. However, it also increases PP and GLP-1, especially in women with obesity. Fasting during daily activities may reorganize a complex network of endocrine signals that can somehow modulate homeostatic and hedonic eating behavior.

Uso de NT-proBNP en el seguimiento ambulatorio de pacientes con insuficiencia cardiaca con fracción de eyección del ventrículo izquierdo reducida en una unidad multidisciplinaria de insuficiencia cardiaca

Introducción: La insuficiencia cardíaca (IC) es un síndrome clínico prevalente a nivel mundial, que se beneficia del abordaje multidisciplinario, pero su seguimiento ambulatorio sigue siendo un reto. La utilidad diagnóstica y pronóstica del NT-proBNP está apoyada en la evidencia actual; pero su uso en el seguimiento aún no ha sido definido. En el presente estudio se busca determinar si la variación en el tiempo del valor de NT-proBNP se relacionó con modificación en el tratamiento farmacológico de pacientes ambulatorios con IC y fracción de eyección del ventrículo izquierdo reducida (FEVI ≤ 40%) de una unidad multidisciplinaria de insuficiencia cardíaca (UMIC). Metodología: Estudio cohorte retrospectivo, de pacientes que cumplieron con los criterios de inclusión: 2 o más cuantificaciones de NT-proBNP en 12 meses y un seguimiento mínimo de 2 años entre los años 2013 y 2017. Resultados: De un total de 566 sujetos integrantes de cohorte activa de UMIC se incluyeron 107 que cumplieron criterios de inclusión; la mayoría hombres (58%), edad mediana de 63 años (Q1;Q3: 55,9;71,2 años), la principal comorbilidad fue hipertensión arterial (71%). En 56% de la población la etiología de IC fue no isquémica y el 50% tenía una clase funcional - NYHA I. La mediana de NT-proBNP basal fue de 698 pg/ml (Q1;Q3: (218;1564 pg/ml), con FEVI basal mediana de 30% (Q1;Q3: 27%;40%). En 55% de los pacientes la variación del valor de NT-proBNP durante el seguimiento se relacionó con modificaciones en el tratamiento farmacológico. Conclusiones: En la mitad de la población de nuestra cohorte se evidenció que los valores de NT-proBNP se relacionaron con cambios en el tratamiento farmacológico, independientemente de la situación clínica.

Introduction: Heart failure (HF) is a prevalent clinical syndrome worldwide, which benefits from a multidisciplinary approach, but its outpatient follow-up remains a challenge. The diagnostic and prognostic utility of NT-proBNP is supported by current evidence, but its use in monitoring has not yet been defined. The present study sought to determine whether the variation over time in the value of NT-proBNP was related to changes in the pharmacological treatment of outpatients with HF and reduced left ventricular ejection fraction (LVEF ≤ 40%) in a multidisciplinary heart failure unit. (MHFU). Methodology: Retrospective cohort study of patients, who met the inclusion criteria: 2 or more quantifications of NT-proBNP in 12 months and a minimum follow-up of 2 years between 2013 and 2017. Results: Of 566 members of the MHFU active cohort, 107 met the inclusion criteria; most men (58%), median age 63 years (Q1;Q3: 55.9;71.2), the main comorbidity was arterial hypertension (71%). The etiology of HF was non-ischemic in 56% of the population, and 50% had a functional class - NYHA I. Median baseline NT-proBNP was 698 pg/ml (Q1;Q3: (218;1564), with median baseline LVEF of 30% (Q1;Q3: 27;40). In 55% of the patients, the variation in the NT-proBNP value during follow-up was related to changes in pharmacological treatment. Conclusions: In half of the population of our cohort, it was shown that NT-proBNP values were related to changes in pharmacological treatment, regardless of the clinical situation.

Introdução: A insuficiência cardíaca (IC) é uma síndrome clínica prevalente em todo o mundo, que se beneficia de uma abordagem multidisciplinar, mas seu acompanhamento ambulatorial continua sendo um desafio. A utilidade diagnóstica e prognóstica do NT-proBNP é suportada pelas evidências atuais, mas seu uso no monitoramento ainda não foi definido. O presente estudo procurou determinar se a variação ao longo do tempo no valor do NT-proBNP estava relacionada a mudanças no tratamento farmacológico de pacientes ambulatoriais com IC e fração de ejeção do ventrículo esquerdo (FEVE ≤ 40%) reduzida em uma unidade multidisciplinar de insuficiência cardíaca. (UMIC). Metodologia: Estudo de coorte retrospectivo de pacientes que preencheram os critérios de inclusão: 2 ou mais quantificações de NT-proBNP em 12 meses e seguimento mínimo de 2 anos entre 2013 e 2017. Resultados: Dos 566 membros da coorte ativa do UMIC, 107 preencheram os critérios de inclusão; maioria dos homens (58%), idade mediana 63 anos (Q1;Q3: 55,9;71,2), a principal comorbidade foi hipertensão arterial (71%). A etiologia da IC foi não-isquêmica em 56% da população, e 50% tinham classe funcional - NYHA I. A mediana basal do NT-proBNP foi de 698 pg/ml (Q1;Q3: (218;1564), com mediana basal FEVE de 30% (Q1;Q3: 27;40). Em 55% dos pacientes, a variação do valor de NT-proBNP durante o seguimento esteve relacionada a mudanças no tratamento farmacológico. Conclusões: Em metade da população do nosso coorte, foi demonstrado que os valores de NT-proBNP estavam relacionados a mudanças no tratamento farmacológico, independentemente da situação clínica.

Relación entre el fármaco semaglutida y la reducción de peso en pacientes con obesidad: una revisión sistemática / Relation between the drug semaglutide and weight reduction in patients with obesity: a systematic review / Relação entre a droga semaglutida e a perda de peso em pacientes obesos: uma revisão sistemática

El tratamiento farmacológico para la obesidad es muy limitado, entre los existentes en el mercado, destaca la Semaglutida, ampolla subcutánea que se aplica semanalmente y se usa en pacientes con diabetes y obesidad. OBJETIVO: establecer la relación de Semaglutida como un potencial fármaco para el tratamiento de obesidad. MÉTODO: estudio de tipo descriptivo, principalmente enfocado en la revisión y análisis de investigaciones publicadas en bases de datos científicas de alta relevancia, restringiéndose únicamente a publicaciones del 2015 en adelante (2022) que engloben como tópico principal el uso de Semaglutida. RESULTADO: se identificaron 802 registros en las bases de datos, aplicando los criterios de selección se identificaron 45 artículos como potenciales fuentes de información, finalmente se seleccionaron 15 artículos con datos altamente relevantes para esta revisión, donde se consideró la dosis del fármaco para la reducción de peso se observa que a mayor cantidad de Semaglutida se obtiene una reducción significativa de peso, llegando a una media de 11.82 kg. CONCLUSIÓN: el tratamiento semanal con Semaglutida administrada a nivel subcutánea con cambios en el estilo de alimentación y actividad física, dan como resultados pérdida de peso sostenida en el tiempo clínicamente relevante, pudiendo llegar a la aplicabilidad en pacientes cuyo tratamiento por otros métodos más convencionales no es eficiente.

Pharmacological treatment for obesity is very limited; among those available on the market, Semaglutide, a subcutaneous ampoule applied weekly and used in patients with diabetes and obesity, stands out. OBJETIVE: to establish the relationship of Semaglutide as a potential drug for the treatment of obesity. METHOD: descriptive study, mainly focused on the review and analysis of research published in scientific databases of high relevance, restricting only to publications from 2015 onwards (2022) that include as main topic the use of Semaglutide. RESULT: 802 records were identified in the databases, applying the selection criteria 45 articles were identified as potential sources of information, finally 15 articles were selected with highly relevant data for this review, where the dose of the drug for weight reduction was considered, it is observed that the greater the amount of Semaglutide a significant weight reduction is obtained, reaching a mean of 11.82 kg. CONCLUSION: weekly treatment with Semaglutide administered subcutaneously with changes in eating style and physical activity, results in clinically relevant sustained weight loss over time, being able to reach applicability in patients whose treatment by other more conventional methods is not efficient.

Entre os tratamentos existentes no mercado, destaca-se Semaglutide, uma ampola subcutânea que é aplicada semanalmente e utilizada em pacientes com diabetes e obesidade. OBJETIVO: estabelecer a relação do Semaglutide como uma droga potencial para o tratamento da obesidade. METODO: estudo descritivo, focado principalmente na revisão e análise de pesquisas publicadas em bases de dados científicos altamente relevantes, restringindo-se apenas a publicações a partir de 2015 (2022) que incluem o uso do Semaglutide como tema principal. RESULTADOS: 802 registros foram identificados nos bancos de dados, aplicando os critérios de seleção 45 artigos foram identificados como fontes potenciais de informação, finalmente 15 artigos foram selecionados com dados altamente relevantes para esta revisão, onde a dose do medicamento para redução de peso foi considerada, observa-se que quanto maior a quantidade de Semaglutide uma redução de peso significativa é obtida, atingindo uma média de 11,82 kg. CONCLUSAO: o tratamento semanal com Semaglutide administrado subcutaneamente com mudanças na dieta e na atividade física resulta em perda de peso sustentada clinicamente relevante ao longo do tempo, e pode ser aplicável em pacientes cujo tratamento por outros métodos mais convencionais não é eficiente.

Análise Crítica e Limitações do Diagnóstico de Insuficiência Cardíaca com Fração de Ejeção Preservada (ICFEp) / Critical Analysis and Limitations of the Diagnosis of Heart Failure with Preserved Ejection Fraction (HFpEF)

Resumo Com o aumento da expectativa de vida da população e a maior frequência de fatores de risco como obesidade, hipertensão arterial e diabetes, espera-se um aumento na prevalência de insuficiência cardíaca com fração de ejeção preservada (ICFEp). Entretanto, no momento, o diagnóstico e o tratamento de pacientes com ICFEp permanecem desafiadores. O diagnóstico sindrômico de ICFEp inclui diversas etiologias e doenças com tratamentos específicos, mas que apresentam pontos em comum em relação à apresentação clínica e à avaliação laboratorial no que diz respeito aos biomarcadores como BNP e NT-ProBNP, à avaliação ecocardiográfica do remodelamento cardíaco e às pressões de enchimento diastólico ventricular esquerdo. Extensos ensaios clínicos randomizados envolvendo a terapia nesta síndrome falharam na demonstração de benefícios para o paciente, fazendo-se necessária uma reflexão acerca do diagnóstico, dos mecanismos de morbidade, da taxa de mortalidade e da reversibilidade. Na revisão, serão abordados os conceitos atuais, as controvérsias e, especialmente, os desafios no diagnóstico da ICFEp através de uma análise crítica do escore da European Heart Failure Association.

Abstract With the increase in the population's life expectancy and the higher frequency of risk factors such as obesity, hypertension and diabetes, an increase in the prevalence of heart failure with preserved ejection fraction (HFpEF) is expected. However, to date, the diagnosis and treatment of patients with HFpEF remain challenging. The syndromic diagnosis of HFpEF includes several etiologies and diseases with specific treatments but has points in common regarding the clinical presentation, laboratory evaluation related to biomarkers, such as BNP and NT-ProBNP, and echocardiographic evaluation of cardiac remodeling and left ventricular diastolic filling pressures. Extensive randomized clinical trials involving the treatment of this condition have failed to demonstrate benefits to the patient, making it necessary to reflect on the diagnosis, mechanisms of morbidity, mortality and reversibility in this syndrome. In this review, the current concepts, controversies and challenges, especially regarding diagnosis, will be addressed, critically analyzing the European Heart Failure Association score for the diagnosis of HFpEF.

Avaliação da Relação entre Níveis de Adropina e Circulação Colateral Coronária em Pacientes com Síndrome Coronariana Crônica / Assessment of the Relationship Between the Adropin Levels and the Coronary Collateral Circulation in Patients wıth Chronic Coronary Syndrome

Resumo Fundamento A circulação colateral coronária (CCC) proporciona um fluxo sanguíneo alternativo a tecido miocárdico exposto a isquemia e ajuda a preservar as funções miocárdicas. A produção endotelial de óxido nítrico (NO) e o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) foram apontados como os fatores mais importantes no desenvolvimento da CCC. A adropina é um hormônio peptídeo responsável pela hemostasia energética, e é conhecida por seus efeitos positivos no endotélio por NO e VEGF. Objetivo O objetivo deste estudo é investigar a associação entre adropina e a presença de CCC em pacientes com síndrome coronariana crônica (SCC) Métodos Um total de 102 pacientes com SCC, que tinham oclusão total de pelo menos 1 artéria coronária epicárdica importante, foram incluídos no estudo e foram divididos em dois grupos: o grupo de pacientes (n: 50) com CCC ruim (Rentrop 0-1) e o grupo de pacientes (n: 52) com CCC boa (Rentrop 2-3). O nível de significância adotado para a análise estatística foi 5%. Resultados Os níveis médios de adropina identificados foram 210,83±17,76 pg/mL e 268,25±28,94 pg/mL nos grupos com CCC ruim e boa, respectivamente (p<0,001). Detectou-se que os níveis de adropina têm correlação com as razões neutrófilo-linfócito (r: 0,17, p: 0,04) e com os escores de Rentrop (r: 0,76, p<0,001), e correlação negativa com idade (r: -0,23, p: 0,01) e com os escores Gensini (r: -0,19, p: 0,02). O nível de adropina é um preditor independente da boa evolução da CCC (RC: 1.12, IC 95%: (1,06-1,18), p<0,001). Conclusão Este estudo sugere que os níveis de adropina podem ser um fator associado à de CCC em pacientes com SCC.

Abstract Background Coronary collateral circulation (CCC) provides an alternative blood flow to myocardial tissue exposed to ischemia and helps to preserve myocardial functions. Endothelial-derived nitric-oxide (NO) production and vascular endothelial growth factor (VEGF) have been suggested as the most important factors in the development of CCC. Adropin is a peptide hormone responsible for energy hemostasis, and is known for its positive effects on the endothelium through NO and VEGF. Objective The aim of this study is to investigate the association between adropin and the presence of CCC in patients with chronic coronary syndrome (CCS). Methods A total of 102 patients with CCS, who had complete occlusion of at least one major epicardial coronary artery, were included in the study and were divided into two groups: the group of patients (n:50) with poor CCC (Rentrop 0-1) and the group of patients (n:52) with good CCC (Rentrop 2-3). The level of significance adopted in the statistical analysis was 5%. Results Mean adropine levels were found as 210.83±17.76 pg/mL and 268.25±28.94 pg/mL in the poor and good CCC groups, respectively (p<0.001). Adropin levels proved to be positively correlated with neutrophil-to-lymphocyte ratios (r:0.17, p:0.04) and the rentrop scores (r:0.76, p<0.001), and negatively correlated with age (r:-0.23, p:0.01) and Gensini scores (r:-0.19, p:0.02). Adropin level is a strong independent predictor of good CCC development (OR:1.12, 95% CI:(1.06-1.18), p<0.001). Conclusion This study suggests that adropin levels may be a possible factor associated with the presence of CCC in CCS patients.

Potencial antioxidante de hidrolisados proteicos obtidos a partir de caseinato de ruminantes pela ação de proteases comerciais / Potential antioxidant of protein hydrolysates obtained from ruminant caseinate by the action of commercial proteases

Introdução: a oxidação em sistemas biológicos está relacionada ao desenvolvimento de patologias em humanos. A ingestão de alimentos ricos em compostos químicos que exercem atividade antioxidante contribui para a prevenção e redução dos efeitos deletérios dos radicais livres formados no organismo. Peptídeos derivados das caseínas têm mostrado um elevado potencial como agentes antioxidantes. Objetivos: neste sentido, o presente estudo avaliou a atividade antioxidante de hidrolisados derivados de caseínas de leites das espécies bubalina, bovina e caprina, obtidos pela ação de diferentes proteases. Metodologia: inicialmente, as caseínas foram isoladas dos demais componentes do leite, depois foram submetidas ao processo de proteólise pelas enzimas bromelina, papaína, tripsina e neutrase, individualmente. A atividade antioxidante dos hidrolisados foi avaliada, através da capacidade de eliminação dos radicais: hidroxila (OH­Ë™), superóxido (O2­Ë™), 2,2 difenil-1-picrilhidrazil (DPPH˙), 2,2'azinobis-(3-ácido etilbenzotiazolino-6-sulfônico (ABTS˙), e quelante dos íons metálicos cobre (Cu2+) e ferro (Fe2+). Resultados: os resultados mostraram que a caseína bovina apresentou o menor (35,54%) grau de hidrólise e a caseína bubalina apresentou o maior (85,64%) grau de hidrólise pela ação da neutrase e bromelina após 480 minutos, respectivamente. O potencial para o sequestro dos radicais hidroxila variou entre 0 e 100%, superóxido superior a 80%, ABTS superior a 85%, DPPH entre 20 e 95% habilidade de quelar ferro entre 10 e 100% e cobre entre 14 e 80%. Conclusão: assim, a hidrólise das caseínas do leite bubalino, bovino e caprino foram capazes de produzir hidrolisados com elevado potencial antioxidante e que, mediante novos estudos, poderá vir ser incorporado em produtos alimentícios para o consumo humano.

Introduction: oxidation in biological systems is related to the development of pathologies in humans. The ingestion of foods rich in chemical compounds that exert antioxidant activity contributes to the prevention and reduction of the deleterious effects of free radicals formed in the body. Peptides derived from caseins have shown high potential as antioxidant agents. Objectives: the present study evaluated the antioxidant activity of casein hydrolysates derived from bubaline, bovine, and caprine milk obtained by the action of different proteases. Methodology: initially, the caseins were isolated from the other milk components, and then subjected to the proteolysis process by the enzymes bromelain, papain, trypsin and neutrase, individually. The antioxidant activity of the hydrolysates was evaluated, through the capacity of elimination of the radicals: hydroxyl (OH-˙), superoxide (O2-˙), 2,2 diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH˙), 2,2'azinobis-(3-ethylbenzothiazolino-6-sulfonic acid (ABTS˙), and chelating of the metal ions copper (Cu2+) and iron (Fe2+). Results: the results showed that bovine casein showed the lowest (35.54%) degree of hydrolysis and bubaline casein showed the highest (85.64%) degree of hydrolysis by the action of neutrase and bromelin after 480 minutes, respectively. The potential for hydroxyl radical sequestration varied between 0 and 100%, superoxide higher than 80%, ABTS higher than 85%, DPPH between 20 and 95% and the ability to chelate iron between 10 and 100% and copper between 14 and 80%. Conclusion: thus, the hydrolysis of caseins from bubaline, bovine and goat milk were able to produce hydrolysates with high antioxidant potential and that, upon further studies, may be incorporated into food products for human consumption.

Melitina: o uso do principal componente da peçonha de abelha no combate de linhagens de células tumorais pulmonares / Melittin: the use of the main component of bee venom in the fight against lung tumor cell lines

Introdução: Melitina é um peptídeo formado por 26 aminoácidos e principal composto da peçonha produzida por abelhas do gênero Apis. Estudos pré-clínicos têm demonstrado uma capacidade antineoplásica do composto, evidenciando seu efeito sobre linhagens celulares de câncer. O câncer de pulmão é o câncer que mais mata no mundo, sendo que 90% dos casos da doença estão relacionados a um histórico tabagista. O diagnóstico tardio muitas vezes devido à falta de sintomas clínicos compromete diretamente o tratamento e o prognóstico, gerando uma baixa taxa de sobrevida. Neste sentido, a melitina surge como uma abordagem no tratamento de câncer de pulmão. Objetivo: Realizar uma revisão integrativa da literatura sobre as pesquisas publicadas nos últimos cinco anos sobre o efeito da melitina em linhagens de células tumorais pulmonares humanas. Resultados: Foram encontradas 15 publicações, 10 foram excluídas por não responderem diretamente ao objetivo proposto ou por se tratarem de artigos duplicados e cinco foram escolhidas para compor esta revisão. Discussão: Os artigos avaliados relatam o efeito anticancerígeno da melitina sobre linhagens celulares de câncer de pulmão in vitro e in vivo. Conclusão: Devido sua atividade citotóxica a melitina é uma candidata no desenvolvimento de novos tratamentos de câncer.

Introduction: Melittin is a peptide formed by 26 amino acids and the main compound of the venom produced by honeybees. Preclinical studies demonstrated an antineoplastic capacity of the compound, evidencing its effect on cancer cell lines. Lung cancer is the deadliest cancer in the world, nine out of ten cases of this disease are related to smoking history. Late diagnosis, often due to lack of clinical symptoms, directly compromises treatment and prognosis, generating a low survival rate. In this sense, melittin appears as a therapeutic approach in lung cancer treatment. Objective: Carry out an integrative review of the literature on research published in the last five years about the effect of melittin on human lung tumor cell lines. Results: 15 publications were found, 10 were excluded because they didn't respond directly to the proposed objective or because they were duplicate articles, and five were chosen to compose this review. Discussion: Melittin proved to be efficient in controlling lung tumor cell lines, corroborating the results already reported in other tumor cell lines. Conclusion: The use of melittin is a potential approach in the treatment of lung cancer.

Rol de los péptidos natriuréticos en insuficiencia cardíaca: El fino equilibrio entre la medicina de precisión y la optimización de los recursos

La insuficiencia cardíaca constituye la fase final de la mayoría de las patologías cardiovasculares. Si bien el interrogatorio, el conocimiento de los antecedentes personales y familiares del paciente, sumados al examen físico detallado, contribuyen en sobremanera al diagnóstico; muchas veces el diagnóstico diferencial del síndrome de insuficiencia cardíaca no nos permite diferenciar entre los cuadros compensados de aquellos portadores de insuficiencia cardíaca en las primeras fases de la descompensación o nos llevan a la duda entre diagnósticos diferenciales. La falta de disponibilidad de camas de hospitalización, problemas de cobertura médica o incluso problemas sociales o psicológicos, obligan muchas veces a la determinación de altas precoces con el riesgo presente de descompensaciones e internaciones reiteradas. Evitar descompensaciones frecuentes es el trabajo silencioso que debe realizar el médico para tratar de detectar precozmente con la finalidad de enlentecer o detener el progreso de la enfermedad cardiovascular, evitando estudios e internaciones costosas. Entre el armamento necesario para cumplir con esta finalidad se encuentra el dosaje de péptidos natriuréticos. La presente revisión trata de resumir los datos disponibles que valoran el control de los niveles de péptidos natriuréticos en nuestra asistencia de los pacientes con insuficiencia cardíaca.

Heart failure constitutes the final stage of most cardiovascular diseases. Although the questioning, the knowledge of the patient s personal and family history, added to the detailed physical examination, greatly contribute to the diagnosis; Many times the differential diagnosis of heart failure syndrome does not allow us to differentiate between the compensated conditions of those with heart failure in the early stages of decompensation or leads us to doubt between differential diagnoses. The lack of availability of hospital beds, problems of medical coverage or even social or psychological problems, often force the determination of early discharges with the present risk of decompensation and repeated hospitalizations. Avoiding frequent decompensations is the silent work that the physician must do to try to detect it early in order to slow down or stop the progress of cardiovascular disease, avoiding expensive studies and hospitalizations. Among the weapons necessary to fulfill this purpose is the dosage of natriuretic peptides. This review attempts to summarize the available data that assess the control of natriuretic peptide levels in our care of patients with heart failure.

A insuficiência cardíaca constitui o estágio final da maioria das doenças cardiovasculares. Apesar do questionamento, o conhecimento da história pessoal e familiar do paciente, somado ao exame físico detalhado, contribuem muito para o diagnóstico; Muitas vezes, o diagnóstico diferencial da síndrome da insuficiência cardíaca não nos permite diferenciar as condições compensadas dos portadores de insuficiência cardíaca nos estágios iniciais de descompensação ou nos leva à dúvida entre os diagnósticos diferenciais. A falta de disponibilidade de leitos hospitalares, problemas de cobertura médica ou mesmo problemas sociais ou psicológicos, muitas vezes obrigam à determinação de altas precoces com o risco atual de descompensação e hospitalizações repetidas. Evitar descompensações frequentes é o trabalho silencioso que o médico deve fazer para tentar detectá-la precocemente, a fim de retardar ou interromper o progresso das doenças cardiovasculares, evitando estudos e internações dispendiosas. Entre as armas necessárias para cumprir esse propósito está a dosagem de peptídeos natriuréticos. Esta revisão tenta resumir os dados disponíveis que avaliam o controle dos níveis de peptídeo natriurético em nosso tratamento de pacientes com insuficiência cardíaca.

Associação entre os Níveis Séricos de Elabela e Oclusão Total Crônica em Pacientes com Angina Pectoris Estável / Association Between Serum Elabela Levels and Chronic Totally Occlusion in Patients with Stable Angina Pectoris

Resumo Fundamento: Os efeitos benéficos do elabela no sistema cardiovascular foram demonstrados em estudos. Objetivo: Comparar os níveis séricos de elabela de pacientes com oclusão total crônica (OTC) com pacientes controle com artérias coronárias normais e investigar se há correlação com o desenvolvimento colateral. Métodos: Estudo transversal e prospectivo. O estudo incluiu cinquenta pacientes (28,0% mulheres, idade média 61,6±7,3 anos) com OTC em pelo menos um vaso coronário e 50 pacientes (38% mulheres, idade média 60,7±6,38 anos) com artérias coronárias normais. Os pacientes do grupo OTC foram divididos em dois grupos: Rentrop 0-1, composto por pacientes com fraco desenvolvimento colateral e Rentrop 2-3, composto por pacientes com bom desenvolvimento colateral. Além da idade, sexo, características demográficas e exames laboratoriais de rotina dos pacientes, foram medidos os níveis de elabela. Resultados: As características demográficas e os valores laboratoriais mostraram-se semelhantes em ambos os grupos. Ao passo que o nível médio de NT-proBNP e troponina estava maior no grupo OTC, o nível médio de elabela estava menor (p<0,05 para todos). Na análise de regressão multivariada, os níveis de NT-proBNP e elabela foram considerados preditores independentes para OTC. Além disso, o nível de elabela apresentou-se estatisticamente maior em pacientes do grupo Rentrop 2-3 em comparação com os pacientes do grupo Rentrop 0-1 (p<0,05). Conclusões: Em nosso estudo, mostramos que o nível médio de elabela estava baixo em pacientes com OTC em comparação com pacientes normais. Além disso, constatamos que o nível de elabela é inferior em pacientes com desenvolvimento colateral fraco em comparação com pacientes com bom desenvolvimento colateral. (Arq Bras Cardiol. 2021; [online].ahead print, PP.0-0)

Abstract Background: The beneficial effects of Elabela on the cardiovascular system have been shown in studies. Objective: To compare serum Elabela levels of chronic total occlusion (CTO) patients with control patients with normal coronary arteries, and to investigate whether there is a correlation with collateral development. Methods: The study was planned cross-sectionally and prospectively. Fifty patients (28.0% female, mean age 61.6±7.3years) with CTO in at least one coronary vessel and 50 patients (38% female, mean age 60,7±6.38 years) with normal coronary arteries were included in the study. Patients in the CTO group were divided into two groups as Rentrop 0-1, those with weak collateral development, and Rentrop 2-3 with good collateral development. In addition to the age, sex, demographic characteristics and routine laboratory tests of the patients, Elabela levels were measured. Results: Demographic characteristics and laboratory values were similar in both groups. While the mean NT-proBNP and troponin were higher in the CTO group, the Elabela mean was lower (p <0.05 for all). In the multivariate regression analysis, NT-proBNP and Elabela levels were found to be independent predictors for CTO. Also, Elabela level was found to be statistically higher in Rentrop class 2-3 patients compared to Rentrop class 0-1 patients (p<0.05). Conclusion: In our study, we showed that the average Elabela level was low in CTO patients compared to normal patients. In addition, we found the level of Elabela to be lower in patients with weak collateral development compared to patients with good collateral development. (Arq Bras Cardiol. 2021; [online].ahead print, PP.0-0)

Age-related episodic memory decline and the role of amyloid-ß: a systematic review / Declínio da memória episódica relacionado à idade e o papel da beta-amiloide: uma revisão sistemática

ABSTRACT Aging has been associated with the functional decline of episodic memory (EM). Unanswered questions are whether the decline of EM occurs even during healthy aging and whether this decline is related to amyloid-β (Aβ) deposition in the hippocampus. Objective: The main purpose of this study was to investigate data on the relationship between the age-related EM decline and Aβ deposition. Methods: We searched the Cochrane, MEDLINE, Scopus, and Web of Science databases and reference lists of retrieved articles that were published in the past 10 years. The initial literature search identified 517 studies. After screening the title, abstract, key words, and reference lists, 56 studies met the inclusion criteria. Results: The overall results revealed that increases in Aβ are related to lower hippocampal volume and worse performance on EM tests. The results of this systematic review revealed that high levels of Aβ may be related to EM deficits and the progression to Alzheimer's disease. Conclusions: We discussed the strengths and pitfalls of various tests and techniques used for investigating EM and Aβ deposition, methodological issues, and potential directions for future research.

RESUMO O envelhecimento tem sido associado a um declínio funcional da memória episódica (ME). Algo ainda sem resposta é se o declínio da ME ocorre mesmo no envelhecimento saudável e se esse declínio pode estar relacionado à deposição de Aβ no hipocampo. Objetivo: Nosso objetivo principal foi investigar os dados sobre a relação entre a memória episódica e a deposição de Aβ no envelhecimento saudável. Métodos: Nós buscamos nas bases de dados Cochrane, MEDLINE, Scopus, Web of Science e nas listas de referências dos estudos dos últimos 10 anos. A busca inicial nas bases de dados identificou 517 estudos. Após a triagem de título, resumos, palavras-chave e referências, 56 estudos atenderam aos critérios de inclusão. Resultados: O resultado geral revelou que o aumento de Aβ estava relacionado ao menor volume do hipocampo e pior desempenho em testes de ME. Em resumo, os resultados da presente revisão sistemática revelaram que altos níveis de Aβ podem estar relacionados ao declínio de ME e conversão progressiva para a Doença de Alzheimer. Conclusões: Aqui, discutimos os pontos fortes e as limitações dos testes e técnicas para investigar a deposição ME e Aβ, bem como questões metodológicas e direções futuras.

Síntesis en fase sólida de un neuropéptido cosmecéutico y su microencapsulación en un sistema liposomal / Solid phase synthesis of a cosmeceutical neuropeptide and its microencapsulation in a liposomal system / Síntese de fase sólida de um neuropeptídeo cosmecêutico e sua microencapsulação em um sistema lipossomal

RESUMEN Introducción: Actualmente los péptidos sintéticos se han constituido en una novedosa alternativa para el tratamiento de la piel envejecida. Acetilhexapéptido-3 (Ac-EEMQRR-NH2) ha sido utilizado para inducir reducción de líneas de expresión de manera análoga a la toxina botulínica, pero sin efectos tóxicos. Objetivo: Sintetizar el acetilhexapéptido-3 y desarrollar un sistema liposomal para su encapsulación y favorecer su paso a través de una membrana modelo. Metodología: El péptido fue obtenido mediante síntesis en fase sólida (SFS) empleando la estrategia Fmoc/tBu, fue purificado y plenamente caracterizado. El sistema liposomal con acetilhexapéptido-3 encapsulado fue desarrollado mediante la formación de una emulsión con posterior inversión de fase por evaporación del solvente orgánico. Los sistemas fueron caracterizados en su tamaño, potencial zeta, eficiencia de encapsulación del neuropéptido y de manera preliminar se realizó un estudio de permeabilidad ex vivo. Resultados: Es posible sintetizar péptidos cortos con alto grado de pureza y buen rendimiento, utilizando la metodología de SFS Fmoc/tBu. De acuerdo con la caracterización, el sistema liposomal adelantado sugiere una buena estrategia para la encapsulación del acetilhexapéptido-3 y su potencial aplicación en el desarrollo un novedoso producto cosmecéutico.

SUMMARY Introduction: Currently synthetic peptides have become a novel alternative for the treatment of aging skin. Acetylhexapeptide-3 (Ac-EEMQRR-NH2) has been used to induce reduction of expression lines in a manner analogous to botulinum toxin, but without toxic effects. Aim: To synthesize acetylhexapeptide-3 and to develop a lipo-somal system for its encapsulation and favor its passage through a model membrane. Methodology: The peptide was obtained by solid phase synthesis (SFS) using the Fmoc / tBu strategy, it was purified and fully characterized. The liposomal system with encapsulated acetylhexapeptide-3 was developed by forming an emulsion with subsequent phase inversion by evaporation of the organic solvent. The systems were characterized in their size, zeta potential, neuropeptide encapsulation efficiency and a preliminary ex vivo permeability study was carried out. Results: It is possible to synthesize short peptides with a high degree of purity and good yield, using the SFS Fmoc / tBu methodology. According to the characterization, the advanced liposomal system suggests a good strategy for the encapsulation of acetylhexapeptide-3 and its potential application in the development of a novel cosmeceutical product.

RESUMO Introdução: Atualmente os peptídeos sintéticos têm se tornado uma nova alternativa para o tratamento do envelhecimento cutâneo. O acetilhexapeptídeo-3 (Ac-EEMQR-R-NH2) tem sido usado para induzir a redução das linhas de expressão de maneira análoga à toxina botulínica, mas sem efeitos tóxicos. Objetivo: Sintetizar acetilhe-xapeptídeo-3 e desenvolver um sistema lipossomal para seu encapsulamento e favorecer sua passagem por uma membrana modelo. Metodologia: O peptídeo foi obtido por síntese em fase sólida (SFS) utilizando a estratégia Fmoc / tBu, foi purificado e totalmente caracterizado. O sistema lipossomal com acetilhexapeptídeo-3 encapsulado foi desenvolvido pela formação de uma emulsão com subsequente inversão de fase por evaporação do solvente orgânico. Os sistemas foram caracterizados quanto ao tamanho, potencial zeta, eficiência de encapsulação de neuropeptídeos e um estudo preliminar de permeabilidade ex vivo foi realizado. Resultados: É possível sintetizar peptídeos curtos com alto grau de pureza e bom rendimento, utilizando a metodologia SFS Fmoc / tBu. De acordo com a caracterização, o sistema lipossomal avançado sugere uma boa estratégia para a encapsulação do acetilhexapeptídeo-3 e seu potencial aplicação no desenvolvimento de um novo produto cosmecêutico.

Doença de Alzheimer de início precoce (DAIP): características neuropatológicas e variantes genéticas associadas / Early-onset Alzheimer's Disease (EOAD): neuropathological characteristics and associated genetic variants

RESUMO A doença neurodegenerativa mais comum no mundo é a doença de Alzheimer (DA), e 10% dos casos apresentam sintomas antes dos 65 anos, quase todos com associação genética, com hereditariedade autossômica dominante e penetrância entre 92 a 100% dos portadores. Na presente revisão, realizamos uma busca sobre as variantes genéticas associadas à doença de Alzheimer de início precoce (DAIP), enfatizando as características associadas mais importantes e as principais mutações já descritas. Os genes mais comumente relacionados com o surgimento da DAIP são APP, PSEN1, PSEN2 e MAPT, e mutações nestes afetam o metabolismo e a estrutura destas proteínas, resultando em acúmulos de peptídeo Aβ que causam inflamação e toxicidade no cérebro, levando à ativação da micróglia e promovendo a liberação de fatores neurotóxicos e pró-inflamatórios que aceleram a neurodegeneração. O gene PSEN1 é responsável por 70% das mutações conhecidas da DAIP, sendo a L166P associada à idade de ocorrência da doença abaixo dos 30 anos. Mutações em APP levam à agregação da proteína em placas neurodegenerativas. Todas as mutações descritas para MAPT estão associadas a um aumento dos emaranhados neurofibrilares. O polimorfismo E4 da Apolipoproteína E (APOE) influencia o aumento no risco de DAIP elevando as chances em três vezes para portadores heterozigotos e entre oito a dez vezes para os homozigotos. Apenas 5% das mutações associadas à DAIP são conhecidas, e novos estudos apresentam outros genes candidatos, bem como a importância de alterações epigenéticas na gênese desta doença.

SUMMARY The most common neurodegenerative disease in the world is Alzheimer's Disease (AD). Ten percent of Alzheimer patients experience symptoms before the age of 65, and almost all of them present genetic features of autosomal dominant inheritance nature, and penetrance of 92 to 100%. In the present review, we searched for genetic variants associated with early onset Alzheimer's disease (EOAD), emphasizing the most important characteristics and the main mutations. The genes most commonly related to the onset of EOAD are APP, PSEN1, PSEN2 and MAPT, whose mutations affect the metabolism and structure of these proteins. This process results in accumulations of Aβ peptide that leads to activation of the microglia and release of neurotoxic and pro-inflammatory factors that accelerate neurodegeneration. The PSEN1 gene is responsible for 70% of the known mutations in EOAD, while L166P is associated with below 30 years as the starting age of occurrence. APP mutations lead to protein aggregation in neurodegenerative plaques. All of the mutations described for MAPT are associated with an increase in neurofibrillary tangles. The E4 polymorphism of Apolipoprotein E (APOE) influences an increased risk of EOAD increasing up to three times the chances for heterozygous, and between eight and ten times for homozygotes carriers. Only 5% of the mutations associated with EOAD are known; new studies will show other candidate genes, as well as the importance of epigenetic factors changes in the etio-pathogenesis of this disease.

Cambios en el perfil protéico de E. coli O157:H7 frente al tratamiento con Ib-M1 e IONP@Ib-M1 / Changes in the protein profile of E. coli O157: H7 against treatment with Ib-M1 and IONP@Ib-M1 / Identificação de alterações no perfil protetor de E. coli O157: H7 contra o tratamento com Ib-M1 e IONP@Ib-M1

Resumen Escherichia coli 0157:H7 es una bacteria patógena reconocida por su capacidad de resistencia a diversos antibióticos; razón por la cual, se generan complicaciones en el tratamiento de infecciones producidas por esta bacteria. El péptido Ib-M1 y el bioconjugado I0NP@Ib-M1 han surgido como una nueva alternativa antimicrobiana contra E. coli 0157:H7. El mecanismo de acción de Ib-Mi e I0NP@Ib-M1 contra esta bacteria aún es desconocido; por lo tanto, el objetivo de esta investigación fue identificar el cambio en el perfil de proteínas de E. coli 0157:H7 luego del tratamiento con Ib-M1 e I0NP@ Ib-M1 como primer paso para determinar su mecanismo de acción. Para esto, se llevó a cabo la obtención de proteínas, posteriormente se realizó una electroforesis bidimensional para finalmente realizar la determinación de la variabilidad de los perfiles proteicos. Una vez obtenidos estos perfiles, se llevó a cabo un análisis de varianza (AN0VA). Se identificaron 72 proteínas expresadas diferencialmente, las cuales pueden relacionarse con el efecto sobre el crecimiento de la bacteria en presencia de Ib-M1 e I0NP@Ib-M. Estas proteínas se encuentran involucradas en procesos de transferencia de grupos acilo (proteína Yhbs), translocación de lipoproteínas (proteína LolA) y transporte de aminoácidos (proteína GpmA), entre otros.

Abstract Escherichia coli 0157: H7 is a pathogenic bacterium which is recognized for the ability to resist multiple antibiotics; accordingly, complications occur in the treatment of infections caused by this bacterium. The Ib-M1 peptide and the I0NP @ Ib-M1 bioconjugate have emerged as a new antimicrobial alternatives against E. coli 0157: H7. The mechanism of action of Ib-M1 and I0NP @ Ib-M1 against this bacterium is still unknown; therefore, the goal of this research was to identify the change in the proteins profile of E. coli 0157: H7 after treatment with Ib-M1 and I0NP @ Ib-M1 as a first step to determine its mechanism of action. For this, the proteins were obtained first, and then a two-dimensional electrophoresis was performed to finally determine the variability of the protein profiles. 0nce the protein profiles were obtained, an analysis of variance (AN0VA) was carried out. 72 differentially expressed proteins were identified, which can be connected to the effect on the bacterium's growth in the presence of Ib-M1 and I0NP @ Ib-M. These proteins are involved in acyl groups transfer processes (Yhbs protein), lipoprotein translocation (LolA protein) and amino acid transport (GpmA protein), among others.

Resumo Escherichia coli O157: H7 é uma bactéria patogênica reconhecida por sua capacidade de resistir a vários antibióticos; razão pela qual, complicações são geradas no tratamento de infecções produzidas por essa bactéria. O peptídeo Ib-M1 livre e imobilizado em nanopartículas magnéticas de óxido de ferro (IONP @ Ib-M1) surgiu como uma nova alternativa antimicrobiana contra E. coli O157: H7 e isolados clínicos desta bactéria. O mecanismo de ação de Ib-M1 e IONP @ Ib-M1 contra E. coli O157: H7 ainda é desconhecido; Portanto, o objetivo desta pesquisa foi identificar a alteração no perfil proteico de E. coli O157: H7 após o tratamento com Ib-M1 e IONP @ Ib-M1 como um primeiro passo para determinar seu mecanismo de ação. Para isso, foi realizada a obtenção das proteínas, posteriormente foi realizada uma eletroforese bidimensional para finalmente determinar a variabilidade dos perfis protéicos. Uma vez obtidos os perfis de proteínas, foi realizada uma análise de variância (ANOVA). Os resultados mostram a identificação de proteínas expressas diferencialmente e que estão envolvidas em processos de transferência de grupos acila (proteína Yhbs), translocação de lipoproteínas (proteína LolA) e transporte de aminoácidos (proteína GpmA), entre outros.

Regulación de la actividad enzimática de la NMNAT de Leishmania braziliensis por péptidos representativos de su extremo N-terminal / Regulation of the enzymatic activity of the NMNAT of Leishmania braziliensis by representative peptides derived from its N-terminus end / Regulação da atividade enzimática do NMNAT de Leishmania braziliensis por peptídeos representativos derivados de sua extremidade N-terminal

Resumen El parásito intracelular Leishmania braziliensis es el agente causal de la leishmaniasis cutánea, enfermedad endémica de zonas tropicales, cuyos tratamientos farmacológicos son tóxicos y para la cual no se dispone de una vacuna en la actualidad. Por esta razón, el estudio de las proteínas relacionadas con el metabolismo energético del parásito es relevante dada su importancia para la supervivencia del mismo. En este estudio, utilizando como secuencia plantilla los primeros 18 residuos del extremo N-terminal de la proteína nicotinamida/ nicotinato mononucleótido adenilil transferasa de L. braziliensis (Lb-NMNAT), se sintetizaron péptidos implementando la estrategia Fmoc/ tert-Butilo en una resina Rink amida MBHA. Los péptidos se purificaron por cromatografía en columna C18 y se caracterizaron mediante RP-HPLC. La proteína recombinante 6xHisLb-NMNAT se expresó en células Escherichia coli M15 y se purificó parcialmente empleando cromatografía de afinidad a metales inmovilizados. De esta proteína se confirmó su actividad enzimática a través de ensayos enzimáticos directos analizados por RP-HPLC. Los péptidos sintetizados se utilizaron para evaluar su efecto sobre la actividad enzimática de la proteína 6xHisLb-NMNAT, observándose una modulación diferencial, lo cual resulta promisorio para el diseño de herramientas quimioterapéuticas basadas en la secuencia N-terminal de la proteína Lb-NMNAT.

Abstract The intracellular parasite Leishmania braziliensis is the etiological agent of cutaneous leishmaniasis, an endemic disease in the tropics, whose pharmacological treatments are toxic and for which there is currently no vaccine. For this reason, the study of proteins related to the energy metabolism of the parasite is relevant given its importance for its survival. In this study, based on the first 18 residues of the N-terminal end of the nicotinamide/nicotinate mononucleotide adenylyl transferase protein from L. braziliensis (Lb-NMNAT) as a template, peptides were synthesized implementing the Fmoc/tert-Butyl strategy in a Rink amide MBHA resin. The peptides were purified by C18 column chromatography and characterized by RP-HPLC. The recombinant 6xHisLb-NMNAT protein was expressed in Escherichia coli M15 cells and partially purified using immobilized metal affinity chromatography. The enzymatic activity of the protein was confirmed through direct enzymatic assays analyzed by RP-HPLC. The synthesized peptides were used to evaluate their effect on the enzymatic activity of the 6xHisLb-NMNAT protein, observing a differential modulation, which is promising for the design of chemotherapeutic tools based on the N-terminal sequence of the Lb-NMNAT protein.

Resumo O parasita intracelular Leishmania braziliensis é o agente causador da leishmaniose tegumentar, doença endêmica nos trópicos, cujos tratamentos farmacológicos são tóxicos e para a qual não existe vacina atualmente. Por este motivo, o estudo de proteínas relacionadas ao metabolismo energético do parasita é relevante dada a sua importância para a sua sobrevivência. Neste estudo, usando os primeiros 18 resíduos da extremidade N-terminal da proteína adenilil transferase de nicotinamida/mononucleotídeo nicotinato de L. braziliensis (Lb-NMNAT) como uma sequência modelo, os peptídeos foram sintetizados implementando a estratégia Fmoc/tert-Butil em uma resina Rink amida MBHA. Os peptídeos foram purificados por cromatografia em coluna C18 e caracterizados por RP-HPLC. A proteína recombinante 6xHisLb-NMNAT foi expressa em células de Escherichia coli M15 e parcialmente purificada usando cromatografia de afinidade com metal imobilizado. Desta proteína, sua atividade enzimática foi confirmada por meio de ensaios enzimáticos diretos analisados por RP-HPLC. Os peptídeos sintetizados foram utilizados para avaliar seu efeito na atividade enzimática da proteína 6xHisLb-NMNAT, observando uma modulação diferencial, o que é promissor para o projeto de ferramentas quimioterápicas baseadas na sequência N-terminal da proteína Lb-NMNAT

Biomarcadores salivares do estresse oxidativo em crianças com cárie dentária: revisão sistemática e meta-análises / Salivary biomarkers of oxidative stress in children with dental caries: systematic review and meta-analysis

Objetivo. Avaliar a relação entre biomarcadores salivares de estresse oxidativo e cárie dentária em crianças. Métodos. Estudos realizados em crianças de até 12 anos comparando biomarcadores salivares de estresse oxidativo como malondialdeído (MDA), superóxido dismutase (SOD), ácido úrico, capacidade antioxidante total (TAC) e proteína total, considerando crianças com lesões de cárie dentária e sem cárie foram selecionados. Além disso, parâmetros salivares como fluxo salivar, pH, capacidade tampão e níveis de cálcio foram avaliados. Uma revisão sistemática da literatura foi realizada em 8 bases de dados. A diferença média padronizada (SMD) foi medida usando variância inversa como método estatístico e efeitos aleatórios como modelo de análise, correspondendo a um intervalo de confiança (IC) de 95%. Resultados. Os níveis de TAC foram maiores em crianças afetadas por cárie dentária em comparação com as sem cárie (grupo controle), independentemente da idade (SMD 2,66; IC 1,33; 3,98) ou sexo (SMD 0,98; IC 0,56; 1,39). Quando ajustados para proteína normalizada, os níveis de MDA foram menores no grupo de cárie dentária do que no grupo controle (SMD -16,5; IC - 29,02; -4,00), e os níveis de SOD foram maiores no grupo de cárie dentária (SMD 5,09; IC 0,01; 10,18). A concentração de proteína total na saliva de crianças com cárie dentária foi maior do que no grupo controle, independentemente da idade (SMD 0,98; IC 0,27; 1,69) ou sexo (SMD 0,77; IC 0,45; 1,10). Os parâmetros salivares avaliados apresentaram níveis mais baixos em crianças com cárie dentária (p< 0,05). Conclusões. Os níveis de biomarcadores de estresse oxidativo e parâmetros salivares estão alterados na saliva de crianças com cárie dentária(AU)

Objective. To assess the relationship between salivary biomarkers of oxidative stress and dental caries in children. Methods. Studies conducted in children up to 12 years old comparing salivary biomarkers of oxidative stress such as malondialdehyde (MDA), superoxide dismutase (SOD), uric acid, total antioxidant capacity (TAC), and total protein, considering children with dental caries lesions and caries-free ones were selected. In addition, salivary parameters such as salivary flow, pH, buffering capacity, and calcium levels were evaluated. A systematic literature review was carried out in 8 databases. The standardized mean difference (SMD) was measured using inverse variance as a statistical method and random effects as an analysis model, corresponding to a 95% confidence interval (CI). Results. The TAC levels were higher in children affected by dental caries compared to caries-free ones (control group), regardless of age (SMD 2.66; CI 1.33; 3.98), or gender (SMD 0.98; CI 0.56; 1.39). When adjusted for normalized protein, MDA levels were lower in the dental caries group than in the control group (SMD -16.51; CI -29.02; -4.00), and SOD levels were higher in the dental caries group (SMD 5.09; CI 0.01; 10.18). The total protein concentration in saliva of children with dental caries was higher than in the control group, regardless of age (SMD 0.98; CI 0.27; 1.69), or gender (SMD 0.77; CI 0.45; 1.10). The salivary parameters assessed had lower levels in children affected by dental caries (p<0.05). Conclusions. The levels of oxidative stress biomarkers and salivary parameters are altered in saliva of children with dental caries(AU)

Mecanismos de ação da anexina A1 na doença intestinal inflamatória tratada com infliximabe / Annexin A1 pathways triggered in the inflammatory bowel disease treated with infliximab

As doenças inflamatórias intestinais (DIIs) são enfermidades crônicas desencadeadas por grave inflamação no trato gastrointestinal. Entre os mediadores imunes envolvidos na patogênese das DIIs, o fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) e sugerido como citocina primordial. Assim, ferramentas de inativação da via do TNF-α, como o infliximabe (IFX), tem sido amplamente aplicadas no tratamento destas doenças. Embora o IFX seja eficaz na indução/manutenção de remissão das DIIs, ainda há relatos de efeitos adversos ou pacientes refratários a imunoterapia. Por esse motivo, e emergente a necessidade de identificar biomarcadores associados ao sucesso das terapias biológicas. Estudos prévios em pacientes com Doença de Crohn (DC) mostraram que a expressão da proteína anti-inflamatória anexina A1 (AnxA1) sistêmica e na mucosa intestinal e aumentada após IFX e correlacionada com a melhora da qualidade de vida. A AnxA1 e o seu peptídeo N-terminal, Ac2-26, desempenham suas funções na resolução da inflamação via receptores para peptídeo formilado (FPRs). No presente estudo, nós investigamos de que maneira os FPRs e a AnxA1 participam dos mecanismos do IFX. No modelo de colite experimental induzida por dextran sulfato de sódio (DSS) em camundongos selvagens (WT) e deficientes para AnxA1 endógena (AnxA1-/-), o IFX atenuou as manifestações clínicas da doença apenas em animais WT. O bloqueio dos FPRs com o antagonista Boc-2 reverteu a melhora observada nos animais tratados, enquanto a ausência da AnxA1 endógena revogou completamente a eficácia do tratamento. Ainda, a resposta inflamatória da colite foi exacerbada nos animais AnxA1-/- após IFX, que apresentaram redução de células T regulatórias e aumento da MMP9 no colon, encurtamento do intestino grosso, ausência de melhora histológica e mortalidade de 50%. Nos animais WT, por sua vez, o bloqueio dos FPRs impediu a melhora clínica e a regeneração das criptas mucosas, com desorganização da ß-actina e da borda em escova. Nas células epiteliais do intestino da linhagem Caco-2 estimuladas por TNF-α in vitro, confirmamos que os efeitos protetivos do IFX nas junções celulares são perdidos após bloqueio do FPR1 e do FPR2, comprometendo a integridade desta barreira. No colon, o IFX induziu a expressão e secreção da AnxA1 em células da lamina própria após colite, e essa secreção foi dose-dependente em células da lamina própria tratadas ex vivo, demonstrando que a secreção da AnxA1 por células do tecido conjuntivo pode constituir um dos mecanismos resolutivos desta terapia. Em humanos, o tratamento com IFX na DC não modificou as expressões de FPR1 e FPR2 nos leucócitos circulantes ou da AnxA1 plasmática, não permitindo a diferenciação de pacientes responsivos ou não. No entanto, a AnxA1 tecidual estava aumentada em pacientes que respondem ao IFX, e os níveis de AnxA1 e FPR1 foram negativamente correlacionados a remissão histológica. Por fim, análises de bioinformática revelaram expressões diferenciais dos mRNAs de FPR1, FPR2 e AnxA1 no colon entre pacientes remissivos ou refratários mesmo antes do início das infusões, mas esse mesmo padrão não foi observado nos PBMCs do sangue. Em conclusão, sugerimos que a indução da AnxA1 pode ser um dos mecanismos de resolução do IFX, e que é complementado pela ativação de FPRs. Ainda, estes marcadores podem apresentar valor preditivo da eficácia do IFX, contribuindo para o alcance da remissão da DC de maneira mais rápida e permanente

Inflammatory bowel diseases (IBDs) are chronic debilitating illnesses triggered by severe inflammation of the gastrointestinal tract. The tumor necrosis factor alpha (TNF-α) is pointed out as a primordial mediator of IBD pathogenesis; thus, inactivating tools targeting this cytokine have been widely used to treat these diseases. Although IFX is very efficient in inducing/maintaining remission in patients with IBD, side effects and unresponsiveness are still reported, emerging the need for the identification of biomarkers linked to therapeutical efficacy. In the Crohns disease (CD), systemic and tissue expressions of the anti-inflammatory protein, annexin A1 (AnxA1), are increased after IFX treatment and correlate with life quality improvement according to previous reports. AnxA1 and its N-terminal peptide, Ac2-26, act via formyl peptide receptors (FPRs); therefore, the present investigation aimed to understand how FPRs and AnxA1 participate in IFX mechanisms. In the experimental colitis model induced by dextran sulphate sodium (DSS) in wild-type (WT) and AnxA1-deficient mice (AnxA1-/-), IFX attenuated the clinical manifestations only in the WT group. FPRs blockade using the antagonist, Boc-2, impaired IFX effects in WT mice, while AnxA1 absence completely abrogated its efficacy. Furthermore, the inflammatory response was exacerbated after IFX in AnxA1-/- mice, with reduced T regulatory cells, increased tissue MMP9, large intestine shortening, lack of histological remission and 50% mortality. In WT mice, FPR blockade reverted the clinical recovery and mucosal crypts regeneration, with b-actina and brush border disorganization. Using the intestinal epithelial cell line Caco-2 stimulated with TNF-α in vitro, we confirmed that IFX protective effects on tight junctions are lost after FPR1 and FPR2 blockade, compromising the barrier integrity. In the colonic tissue, the expression and secretion of AnxA1 were induced by IFX after colitis. This secretion was shown to be dose-dependent in cells from the intestinal lamina propria treated ex vivo, demonstrating that secreted AnxA1 could constitute one of the resolutive mechanisms of that therapy. In humans with CD, IFX did not modify the expressions of FPR1 and FPR2 in circulating leukocytes or the plasma AnxA1 levels, not differentiating patients responsive or not. However, tissue AnxA1 expression was augmented in responsive patients, and AnxA1/FPR1 levels were negatively correlated with histological remission. Finally, bioinformatic analyses revealed differential expression of FPR1, FPR2 and AnxA1 mRNAs in the colon among remittent or refractory patients even before the beginning of infusions, which was not observed for samples of blood PBCM. In conclusion, we suggest that inducing tissue AnxA1 might be one of the resolution mechanisms of IFX, which is complemented by the activation of FPRs. Moreover, these markers could present predictive value of IFX efficacy, contributing to reaching an early and more permanent remission in IBD

PEGuilação do peptídeo Lunatina-1 visando novo candidato à fármaco antimicrobiano / PEGylation of the peptide Lunatin-1 aiming at novel candidate for antimicrobial drug

As infecções relacionadas à assistência à saúde (IRAS) podem ser causadas por bactérias, vírus e fungos, sendo de extrema importância para o sistema de tratamento e pacientes. Com o alarmante avanço no surgimento de bactérias resistentes, tem havido uma preocupação crescente com as IRAS de origem bacteriana. Nesse sentido, várias pesquisas buscam alternativas para os fármacos antimicrobianos convencionais, sendo que os peptídeos antimicrobianos (AMPs), como a lunatina-1, aparecem como moléculas promissoras. No entanto, os AMPs geralmente apresentam rápida degradação proteolítica no trato gastrointestinal e meia-vida curta na corrente sanguínea, principais fatores limitantes para sua aplicação no tratamento de IRAS. Entre as estratégias empregadas para superar esses inconvenientes, a PEGuilação apresenta-se como alternativa eficaz que aumenta o tempo de circulação in vivo dos AMPs, resultando na melhora farmacocinética e, em alguns casos, também farmacodinâmica. A PEGuilação consiste na ligação covalente de cadeias de polietileno glicol (PEG) ao peptídeo, que pode ser efetuada por meio de uma reação aleatória ou sítio-específica. Neste trabalho, desenvolveu-se uma PEGuilação sítio-específica no N-terminal da lunatina-1 empregando-se mPEG-NHS de 2 kDa em tampão fosfato 100 mM, visando o aumento da solibilidade deste peptídeo, bem como para avaliar sua ação antimicrobiana. Com relação à reação de PEGuilação, avaliou-se a influência da razão molar PEG:peptídeo (10:1 ou 15:1) a pH 8,5. Foi obtido um rendimento de PEGuilação de 92%, através da análise por RP-HPLC quantitativo. Quanto à purificação da lunatina-1 PEGuilada, foi empregada a técnica semi-preparativa de RP-HPLC utilizando a coluna C18. A caracterização da lunatina-1 PEGuilada, incluindo determinação do grau de PEGuilação, foi realizada por MALDI-TOF Autoflex Speed (Bruker), mostrando que a molécula foi monoPEGuilada na região N-terminal. A atividade antimicrobiana de lunatina-1 livre e bioconjugada frente a diferentes cepas bacterianas, sendo duas Gram-negativas (ATCC 25922 de Escherichia coli e ATCC 9027 de Pseudomonas aeruginosa) e uma Gram-positiva (CECT 239 de Staphylococcus aureus), foi estudada por determinação da concentração inibitória mínima (CIM) em microplaca, sendo que foram obtidos valores de CIM de 86 e 140 µM para o peptídeo liver e PEGuilado, respetivamente. O potencial hemolítico também foi estudado, sendo que a forma PEGuilada mostrou significativa redução da atividade hemolítica em comparação à forma livre. Em suma, a PEGuilação da lunatina-1, aumenta a sua solubilidade e reduz a atividade hemolítica. Porém, para viabilizar esta estratégia a PEGuilação deve ser reversível, pois a conjugação ao polímero reduz atividade antimicrobiana

Health care-related infections (HAIs) caused by bacteria, viruses and fungi are extremely important for patients and health systems. With the alarming advance in the emergence of resistant bacteria, a growing concern with HAIs of bacterial origin is observed. In this sense, several studies investigate alternatives to conventional antimicrobial drugs and antimicrobial peptides (AMPs), such as lunatin-1, appear as promising molecules. However, AMPs generally show rapid proteolytic degradation in the gastrointestinal tract and short half-life in the bloodstream, the main limiting factors for their therapeutic application to treat HAIs. Among the strategies used to overcome these drawbacks, PEGylation presents itself as an effective alternative that increases the in vivo circulation time of AMPs, resulting in improved pharmacokinetics and, in some cases, also pharmacodynamics. PEGylation consists on the covalent attachment of polyethylene glycol (PEG) chains to the peptide, which can be carried out by means of a random or site-specific reaction. In this work, a site-specific PEGylation was developed at the N-terminus of lunatin-1 using 2 kDa mPEG-NHS to increase the solubility of this peptide, as well as to evaluate its antimicrobial activity. Regarding the PEGylation reaction, the influence of the molar ratio PEG: peptide (10: 1 or 15: 1) at pH 8.5 was evaluated and a PEGylation yield of 92% was obtained, based on quantitative RP-HPLC analysis. As for the purification of PEGylated lunatin-1, semi-preparative RP-HPLC was used. The characterization of PEGylated lunatin-1, including determination of the degree of PEGylation, was performed by MALDI-TOF Autoflex Speed (Bruker), showing that the peptide was monoPEGylated in the N-terminal region. The antimicrobial activity of free and bioconjugated lunatin-1 against different bacterial strains, two Gram-negative (ATCC 25922 from Escherichia coli and ATCC 9027 from Pseudomonas aeruginosa), and one Gram positive (CECT 239 from Staphylococcus aureus), was studied by determining the minimum inhibitory concentration (MIC) in a microplate, resulting in MIC values of 86 and 140 µM for the free and PEGylated peptide, respectively. The hemolytic potential was also studied and the PEGylated form showed a significant reduction in hemolytic activity compared to the free form. In short, the PEGylation of lunatin-1 increases its solubility and reduces hemolytic activity. However, to make this strategy feasible, PEGylation must be reversible, since the conjugation to the polymer reduces antimicrobial activity